LTB-TGFβ1融合蛋白原核表达质粒的构建(2)

来源：wenku168.com 资料编号：WK1685248 资料等级：★★★★★ %E8%B5%84%E6%96%99%E7%BC%96%E5%8F%B7%EF%BC%9AWK1685248

资料介绍

目    录
摘要    1
关键词：    1
1前言    2
1.1 转化生长因子β1( TGFβ1)的研究进展    2
1.2 目的及意义    3
2 材料与方法    4
2.1 材料    4
2.2 重组质粒pET-LTB-TGF质粒的构建    4
2.3质粒提取操作步骤    5
2.4 目的片段的双酶切    5
2.5 目的片段凝胶电泳纯化方法操作步骤    5
2.6 pET28-LTB-TGF质粒转化DH5α感受态细菌    6
2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法)    6
2.6 单菌落PCR的方法    7
2.7 质粒测序    7
3 结果    7
3.1单菌落PCR电泳检测    7
3.2质粒提取结果    8
3.3 测序结果    8
4 讨论    8
参考文献    9
致    谢    10

参考文献
[1] Flanders KC.Smad3 as a mediator of the fibrotic response[J].Int J Exp Pathol,2004,85(2):47-64.
[2] Luo X,Ding L,Xu J,Chegini N,etal.Gene exp ression p rofiling of leiomyoma and myometrial smooth muscle cells in response to transforming growth factorbeta.Endocrinology,2005,146(3):1097-1118
[3] Kathleen C. Flanders,Smad3 as a mediator of the fibrotic response[J].Int J Exp Path,2004,85(3):54-55.
[4] 李松军,安荣泽,谢伟.TGFβ1和bFGFs体外诱导成人骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型的实验研究[J].中国矫形外科杂志,2005,13(8):608-611.
[5] Cho W K,Sohn U,Kwak J W .Production and in vitro refolding of a single-chain antibody specific for human plasma apolipoprotein A-I[J].J Biotechnol,2000,77(2-3):169-178.
[6] 宇霞,邓展生,罗为民,等.转化生长因子β1基因转染鼠脂肪间充质干细胞的可行性[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(1):63-69.
[7] 葛艳,尤永进,徐泉兴,等.产肠毒素大肠杆菌肠毒素LTB、STI和STII融合基因的构建与表达研究[J].中国预防兽医学报,2002,24(5):346-348.
[8] I awrence R M,Huang P T，Gliek J etal.Expression of the cloned gene for enterotoxin STb of Escherichia coli [J].Infect，Imm un，1990,58(4)：970-977.
[9] 姜健,杨宝灵,王洪刚.植物基因工程疫苗研究进展与前景展望[J]．吉林农业科学,2003,28(4):47-54.
[10] Murray C J L ,Lopez A D.Alternative projections of mortality and disability by cause 1990-2020-global burden of disease study[J]. Lancet ,1997,349(64):1498-1504.
[11] 姜昌丽.重组人成熟型转化生长因子β1及其抗原表位在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性鉴定[J].中国生物制品学杂志,2007，20(2):77-80.
[12] 田文标,邹全明,张卫军.大肠杆菌不耐热肠毒B亚单位基因工程菌发酵工艺的研究[J].第三军医大学学报,2005,27(2):115-118.
[13] 田文标,邹全明,吴超,等.重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的纯化及生物学活性鉴定[J].第三军医大学学报,2003,25(2):131-134.
[14] 郭学青,邹全明.霍乱毒素及大肠杆菌不耐热肠毒素生物学特性的研究[J].世界华人消化杂志,2000,8(3):325-326.
[15] 卢圣栋.现代分子生物学实验技术第2版[M].北京:中国协和医科大学出版社,1999,261-284.
[16] 徐兵,张兆山,李淑琴,等.大肠杆菌肠毒素的基因融合及其免疫原性的研究[J].中国生物化学与分子生物学报,2002,15(6):903-906.
[17] Homgen J,Fredman P,IAndblad M,eta1.Rabbit intestinal glycoprotein receptor for Escherichia coli heat-labile entero-toxin lacking affinity for cholera toxin[J].Ifect Immun,1982，28(3):424-434.
[18] 许崇波,卫广森.大肠杆菌肠毒素STL-LTB融合基因的高效表达[J].中国预防兽医学报,1999,30(3):249-253.
[19] 申晓靖,段广才,郗园林,等.大肠杆菌不耐热肠毒素基因克隆和无毒突变体mLT63的构建及序列分析[J].河南医学研究,2005,14(2):100-103.